BCA蛋白定量试剂盒

产品说明：

对于微量或少量的血液样品，可以在一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液，并在冰上裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry 法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
该产品不受此影响，因此与之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。该试剂盒在31.25--2000ug/ml浓度范围内有较好的线性关系。

使用说明：
配制工作液: 根据标准品和样品数量，按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B（50:1）配
制适量 BCA 工作液，充分混匀。
2、稀释标准品：将标准品储存液稀释至 31.25～2000ug/ml，推荐使用去离子水或 0.9% NaCl。
管号 稀释液体积 标准品体积 终浓度
A 360ul 240ul(5mg/ml) 2000ug/ml
B 300ul 300ul(从 A 管取) 1000ug/ml
C 300ul 300ul(从 B 管取) 500ug/ml
D 300ul 300ul(从 C 管取) 250ug/ml
E 300ul 300ul(从 D 管取) 125ug/ml
F 300ul 300ul(从 E 管取) 62.5ug/ml
G 300ul 300ul(从 F 管取) 31.25ug/ml
H 300ul 0ul                         0ug/ml（空白）
3、 将 25ul 的标准品和合适浓度范围的样本（比如 5ul 样品+20ul 稀释液）分别添加于 96 孔板的微孔中。
4、 各孔加入 200ul BCA 工作液，充分混匀。
5、 盖上 96 孔板盖，37℃孵育 30 分钟（如果浓度较低，可适当提高孵育温度或延长孵育时间） 。
6、 冷却到室温，用酶标仪测定 A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。